Πίνακας περιεχομένων:
Βίντεο: Πώς μετράτε τη δραστηριότητα των ενζύμων σε ένα εργαστήριο;
2024 Συγγραφέας: Michael Samuels | [email protected]. Τελευταία τροποποίηση: 2024-01-18 09:26
Ενζυμική ανάλυση
- Ενζυμο οι δοκιμασίες είναι εργαστήριο μεθόδους για μέτρηση της ενζυμικής δραστηριότητας .
- Η ποσότητα ή η συγκέντρωση ενός ένζυμο μπορεί να εκφραστεί σε γραμμομοριακές ποσότητες, όπως με οποιαδήποτε άλλη χημική ουσία, ή σε όρους δραστηριότητα σε ένζυμο μονάδες.
- Ενζυμική δραστηριότητα = mole του υποστρώματος που μετατρέπονται ανά μονάδα χρόνου = ρυθμός × όγκος αντίδρασης.
Από αυτή την άποψη, πώς χρησιμοποιείται το φασματοφωτόμετρο για τη μέτρηση της ενζυμικής δραστηριότητας;
Κατά τη διάρκεια ενός φασματοφωτομετρική δοκιμασία , ο χειριστής ακολουθεί την πορεία ενός ένζυμο αντίδραση από μέτρημα οι αλλαγές στην ένταση του φωτός που απορροφάται ή διασκορπίζεται από το διάλυμα της αντίδρασης. Μερικές φορές, πρέπει να είναι περισσότερα από ένα μήκη κύματος μεταχειρισμένος για την παραγωγή ισχυρών σημάτων προς υπολογίζω ο ενζυμική δραστηριότητα.
Επιπλέον, πώς μετράτε τη δραστηριότητα της λακτάσης; Μέτρημα Ενζυμο Δραστηριότητα Προσθέστε 10 μL λακτάση εκχύλισμα στον σωλήνα αντίδρασης Β, αναμίξτε με περιδίνηση και αφήστε την αντίδραση να προχωρήσει για 1 λεπτό σε θερμοκρασία δωματίου. Μόλις περάσει 1 λεπτό, προσθέστε 500 μL ανθρακικού νατρίου 1 Μ και στους δύο σωλήνες για να αναστείλετε το λακτάση ένζυμο αυξάνοντας το ρΗ, τερματίζοντας έτσι την αντίδραση.
Λαμβάνοντας υπόψη αυτό, γιατί μετράμε τη δραστηριότητα των ενζύμων;
Ενζυμική δραστηριότητα είναι ένα μετρήσει από το πόσο ένζυμο υπάρχει σε μια αντίδραση. Υπάρχουν δύο τρόποι για να μέτρηση της ενζυμικής δραστηριότητας : παρακολούθηση της εξαφάνισης του υποστρώματος ή της εμφάνισης του προϊόντος. Ενζυμο οι αναλύσεις μπορούν επίσης να αποκαλύψουν πληροφορίες σχετικά με τα υποστρώματα και τους αναστολείς που μπορεί να επηρεάσουν την ένζυμο.
Ποιοι είναι οι παράγοντες που επηρεάζουν τη δραστηριότητα των ενζύμων;
Διάφοροι παράγοντες επηρεάζουν τον ρυθμό με τον οποίο προχωρούν οι ενζυμικές αντιδράσεις - θερμοκρασία , pH, συγκέντρωση ενζύμου , συγκέντρωση υποστρώματος και την παρουσία οποιωνδήποτε αναστολέων ή ενεργοποιητών.
Συνιστάται:
Πώς μετράτε την γωνία Q σε ένα γωνιόμετρο;
Για να μετρήσετε την γωνία Q, ξεκινήστε με το γόνατο και το ισχίο του ασθενούς σε έκταση και ο τετρακέφαλος μυς χαλαρώνει. Αρχικά, τοποθετήστε τον κεντρικό άξονα ενός γωνιομέτρου με μακρύ χέρι πάνω από το κέντρο της επιγονατίδας. Στη συνέχεια, ψηλαφήστε την εγγύς κνήμη και ευθυγραμμίστε τον κάτω γωνιομετρικό βραχίονα κατά μήκος του τένοντα της επιγονατίδας προς τον κνημιαίο σωλήνα
Πώς μετράτε τη θερμοκρασία σας με ένα θερμόμετρο Vicks;
Καλύψτε το θερμόμετρο με ένα κάλυμμα κορυφής ανιχνευτή και χρησιμοποιήστε μια λιπαντική ζελατίνα για να καλύψετε ολόκληρο το κάλυμμα του ανιχνευτή. Πατήστε το κουμπί λειτουργίας και εισάγετε την άκρη του θερμομέτρου όχι περισσότερο από 1/2 ίντσα στο ορθό. Αφαιρέστε το θερμόμετρο μετά από 10 μπιπ και διαβάστε τη θερμοκρασία
Τι επίδραση είχε το βρασμό στη δραστηριότητα των ενζύμων Γιατί;
Ο βρασμός μειώνει τη δραστηριότητα του ενζύμου, επειδή η λειτουργία του ενζύμου είναι συγκεκριμένη για το περιβάλλον του, όπως η θερμοκρασία και το pH. Οι αλλαγές στη θερμοκρασία ή το pH μπορούν να μετουσιώσουν το ένζυμο, καθώς το σχήμα του θα αλλάξει
Πώς μετράτε τα κύτταρα σε ένα αιμοκυτταρόμετρο;
Για να μετρήσετε τα κύτταρα χρησιμοποιώντας ένα αιμοκυττόμετρο, προσθέστε 15-20Μl κυτταρικού εναιωρήματος μεταξύ του αιμοκυττόμετρου και καλύψτε το γυαλί χρησιμοποιώντας ένα P-20 Pipetman. Ο στόχος είναι να έχουμε περίπου 100-200 κελιά/τετράγωνο. Μετρήστε τον αριθμό των κελιών και στα τέσσερα εξωτερικά τετράγωνα διαιρούμενα με τέσσερα (ο μέσος αριθμός κελιών/τετραγώνου)
Πώς επηρεάζει η ακινητοποίηση του ενζύμου την κινητική των ενζύμων;
Κινητική ακινητοποιημένων ενζύμων. Η ακινητοποίηση μπορεί να επηρεάσει σε μεγάλο βαθμό τη σταθερότητα ενός ενζύμου. Εάν η διαδικασία ακινητοποίησης εισάγει οποιοδήποτε στέλεχος στο ένζυμο, αυτό είναι πιθανό να ενθαρρύνει την αδρανοποίηση των ενζύμων υπό συνθήκες μετουσίωσης (π.χ. υψηλότερες θερμοκρασίες ή ακραίες τιμές pH)