Ποιος είναι ο σκοπός του πρωτογενούς αντισώματος σε ένα στύπωμα Western;

2024 Συγγραφέας: Michael Samuels | [email protected]. Τελευταία τροποποίηση: 2023-12-16 01:41

Με τη μέθοδο της άμεσης ανίχνευσης, ένα ένζυμο ή φθοροφόρο συζευγμένο πρωτογενές αντίσωμα χρησιμοποιείται για την ανίχνευση του αντιγόνου που μας ενδιαφέρει στο κηλίδα Το Στη μέθοδο έμμεσης ανίχνευσης, ένα χωρίς ετικέτα πρωτογενές αντίσωμα χρησιμοποιείται πρώτα για να συνδεθεί με το αντιγόνο.

Επιπλέον, τι είναι το κύριο αντίσωμα στο στύπωμα Western;

ο πρωτογενές αντίσωμα αναγνωρίζει και δεσμεύει τον επίτοπο ή τη συγκεκριμένη αλληλουχία αμινοξέων της πρωτεΐνης που μας ενδιαφέρει. Δευτερεύων αντισώματα που χρησιμοποιείται για κηλίδωση γουέστερν τυπικά είναι συζευγμένα με ένα ένζυμο. τα πιο συχνά χρησιμοποιούμενα ένζυμα είναι η υπεροξειδάση του ραπανιού (HRP) και η αλκαλική φωσφατάση (AP).

Επιπλέον, τι κάνει το κύριο αντίσωμα; Τα πρωτογενή αντισώματα είναι ανοσοσφαιρίνες που συνδέονται με ένα συγκεκριμένο αντιγόνο ( πρωτεΐνη , πεπτίδιο, μικρό μόριο κ.λπ.) ενδιαφέροντος και τυπικά δεν είναι συζευγμένα. Ένα καλό πρωτογενές αντίσωμα αναγνωρίζει και συνδέεται με υψηλή συγγένεια και εξειδίκευση για τον καθαρισμό, τον εντοπισμό και τη μέτρηση του αντιγόνου.

Κατά συνέπεια, ποιος είναι ο σκοπός μιας κηλίδας Γουέστερν;

ΕΝΑ Western blot είναι μια εργαστηριακή μέθοδος που χρησιμοποιείται για την ανίχνευση συγκεκριμένων πρωτεϊνικών μορίων μεταξύ ενός μίγματος πρωτεϊνών. Στη συνέχεια, τα μόρια πρωτεΐνης διαχωρίζονται σύμφωνα με τα μεγέθη τους χρησιμοποιώντας μια μέθοδο που ονομάζεται ηλεκτροφόρηση πηκτής. Μετά τον διαχωρισμό, οι πρωτεΐνες μεταφέρονται από το πήκτωμα σε α κηλίδωση μεμβράνη.

Πώς χρησιμοποιούνται τα αντισώματα στην κηλίδωση Western;

Αντισώματα είναι μεταχειρισμένος για την ανίχνευση πρωτεϊνών στόχων στο Western blot (ανοσοαποτύπωση). ο αντισώματα συνδέονται με φθορίζουσες ή ραδιενεργές ετικέτες ή ένζυμα που δίνουν μια επακόλουθη αντίδραση με ένα εφαρμοζόμενο αντιδραστήριο, οδηγώντας σε χρωματισμό ή εκπομπή φωτός, επιτρέποντας την ανίχνευση.